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高二下册生物酵母细胞的固定化知识点总结

高二生物  2022-03-24 09:550

高二下册生物酵母细胞的固定化知识点总结

1.(酵母细胞的固定化)基础知识

⑴.(有哪些?固定化酶应用的实例?

①.用于高果糖浆的生产;

小资料:高果糖浆是指果糖含量为42%左右的糖浆;

可以作为蔗糖的替代品;

对人类健康有益,不会引起肥胖、糖尿病心血管疾病。

②.怎样生产高果糖浆?

A.原料:葡萄糖;

B.酶:葡萄糖异构酶(稳定性好,能持续发挥作用。);

C.方法:使用固定化技术,将酶固定在颗粒状载体上;

将酶颗粒装到反应柱内(如图4-5);

将葡萄糖溶液从反应柱上端注入;

与酶接触,发生反应,生成果糖;

生成果糖从反应柱下端流出。

⑵.(什么是)固定化细胞技术?

固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术;

包括:包埋法;

化学结合法(将酶分子或细胞相互结合,或将其结合到载体上);

物理吸附法;

①.一般来说,酶更适合哪种方法固定化?为什么?

化学结合法和物理吸附法固定化;

因为酶分子较小;

②.一般来说,细胞更适合用哪种方法固定化?为什么?

细胞多采用包埋法固定化;

因为细胞体积较大。

③.化学结合法常用的载体有哪些?

明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维、聚丙烯酰胺等等

④.选择哪种载体包埋酵母菌细胞?

选用海藻酸钠作载体包埋酵母细胞;

2.(酵母细胞的固定化)实验操作(包括哪些内容?)

⑴.(怎样进行)酵母菌细胞的活化?

称取1g干酵母,放入50mL的小烧杯中,加入蒸馏水10mL,用玻璃棒搅拌,使酵母菌细胞混合

均匀,成糊状,放置1h左右,使其活化。

⑵.(怎样)配制物质量浓度为0.025mol/L的CaCl2溶液?

称取无水CaCl20.83g,放入200mL的烧杯中,加入150mL的蒸馏水,使其充分溶解,待用。

⑶.(怎样)配制海藻酸钠溶液?

称取0.7g海藻酸钠,放入50mL小烧杯中,加入10ml水,酒精灯加热,边加热边搅拌,将海藻

酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至10mL。

注意:加热时要用小火,或者间断加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止。

⑷.(怎样将)海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合?

将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的酵母菌细胞,进行充分搅拌,使其混合

均匀,再转移至注射其中。

⑸.(怎样)固定化酵母菌细胞?

以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,观察液滴在CaCl2溶液中

形成凝胶珠的情形。

将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右。

3.(怎样)用固定化酵母菌发酵?

⑴.将固定化好的酵母菌细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2~3次;

⑵.将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中,再加入固定好的酵母菌细胞,

置于25℃下发酵24h。

4.(酵母细胞的固定化实验)操作提示

⑴.海藻酸钠在水中溶解速度较慢,需要通过加热促进其溶解;

⑵.溶解海藻酸钠,采用小火间断加热的方法,并不断搅拌;

⑶.加热太快,海藻酸钠会焦糊。

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